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CAS号：2591-17-5
分子式：C11H8N2O3S2
分子量：280.32
纯度：>99%
保存：-20℃

产品说明：
D-荧光素(D-Luciferin)是萤火虫荧光素酶底物，其量子效率为0.88，是Luminol的20倍。反应原理为镁离子存在下荧光素酶使荧光素与ATP反应，接着它被氧化形成二氧杂环丁烷结构并发出黄绿色的光。Luciferin-luciferase发光用于ATP监控以测定细胞活力以及细菌计数。它还用于报告基因检测。可与小动物活体成像系统配套使用，用于标记LUC基因后的体内活体荧光检测。也应用于体外分析，高通量测序和各种污染检测。
D-荧光素有三种产品形式，D-荧光素(D-Luciferin,free acid)、D-荧光素钾盐(D-Luciferin,potassium salt)和D-荧光素钠盐(D-Luciferin,sodium salt)，三种形式都易溶于水，在绝大多数的应用上都没有实质性的差别。它们的激发和发射波长分别为328nm和533nm。
使用方法(仅供参考)：
(一)活体成像分析方法
1.用DPBS(不含Mg²⁺、Ca2+)配制15mg/mL的D-Luciferin工作液，0.2μm滤膜过滤除菌。
2.注射量10μL/g的体重，如10g重小鼠，注射100μL工作液(1.5mg D-Luciferin)。
3.腹腔注射10～15分钟后，上机进行图像分析。
(二)体外分析方法
1.用无菌水配置200×的D-Luciferin储备液(30mg/mL)，立即使用，或-20℃保存。
2.用预热好的完全培养基1:200稀释D-Luciferin储备液，配制150μg/mL工作液。
3.去除细胞培养基。
4.向细胞中添加1×的D-Luciferin工作液，37℃孵育5～10min，进行图像分析。
注意事项：
1.钙镁离子可能会抑制荧光素酶的活性，镁离子可能会对荧光素的氧化造成影响，溶解D-Luciferin应使用无钙镁离子的PBS，且要完全溶解。
2.本品要进行避光操作和保存。储存液过滤除菌后可分装于-20℃或-80℃冻存。
3.动物类型体重，以及注射方式都会影响信号的发射，建议每次实验都要做荧光素酶动力学曲线，确定最佳信号平台期和最佳的检测时间。
4.在体外图像分析前，将细胞进行37℃的短时间培养可以增加信号强度。
5.进行ATP的检测，尽量避免外源ATP的污染。
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